熒光,是指一種光致發(fā)光的冷發(fā)光現(xiàn)象。當某種常溫物質(zhì)經(jīng)某種波長的入射光(通常是紫外線或X射線)照射,吸收光能后進入激發(fā)態(tài),并且立即退激發(fā)并發(fā)出比入射光的的波長長的出射光(通常波長在可見光波段);而且一旦停止入射光,發(fā)光現(xiàn)象也隨之立即消失。具有這種性質(zhì)的出射光就被稱之為熒光。在日常生活中,人們通常廣義地把各種微弱的光亮都稱為熒光。
在許多應(yīng)用領(lǐng)域如材料學(xué)、生物學(xué)(葉綠素和類胡蘿卜素)、生物醫(yī)學(xué)(惡性病的熒光診斷)和環(huán)境應(yīng)用中都需要用到熒光檢測技術(shù)。在熒光測量過程中,由于熒光是一種非常微弱的光,所以通常需要高靈敏度光譜儀,一個高效率的濾光片,將樣本發(fā)出的微弱信號光和高強度的激發(fā)光區(qū)別出來。
激發(fā)光打在被測物質(zhì)上,被測物質(zhì)中的分子、原子吸收激發(fā)光的能量后,從低能級躍遷到高能級。該高能級是不穩(wěn)定的,經(jīng)過一段時間后,分子、原子自發(fā)的從非穩(wěn)態(tài)的高能級躍遷到穩(wěn)態(tài)或亞穩(wěn)態(tài)的較低能級,同時發(fā)出一個光子。不同的原子、分子的能級是固定的,因此它們發(fā)出的光子能量是一定的,即波長一定。我們只要測出該熒光的波長,即可以識別所測物質(zhì)的元素和成份,而比較熒光強度,我們可以測出它的含量.
熒光光譜儀是研究藥物與蛋白質(zhì)相互作用的常用儀器。藥物與蛋白質(zhì)相互作用后可能引起藥物自身熒光光譜和蛋白質(zhì)自身熒光(內(nèi)源熒光)光譜以及同步熒光光譜的變化,如熒光強度和偏振度的改變、新熒光峰的出現(xiàn)等,這些均可以提供藥物與蛋白質(zhì)結(jié)合的信息。